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第一章緒論

第一節(jié)

基因的概念

基因工程與生物工程的關(guān)系

第二節(jié)基因工程的操作和應(yīng)用

一、基因工程的操作流程

二、基因工程的應(yīng)用

第二章基因與基因表達

第一節(jié)核酸的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)

一、核酸的化學(xué)組成

二、核酸的結(jié)構(gòu)與功能

三、核酸的變性與復(fù)性

第二節(jié)、基因表達及其調(diào)控

一、基因表達調(diào)控的基本原理

第三章、DNA的提取與純化

第一節(jié)DNA的提取與純化

一、堿抽提法提取DNA，提取DNA的其他方法，DNA的定量和純度測定。

二、掌握基本操作步驟及了解幾種常用化學(xué)試劑在提取DNA中的作用（例如：SDS、EDTA、巰基乙醇的作用）

第四章核酸分子的酶切、連接和修飾

第一節(jié)、工具酶

一、核酸限制性內(nèi)切酶、同裂酶、同尾酶的概念及運用

二、DNA聚合酶

三、DNA連接酶（T4DNA連接酶的連接特性）

第二節(jié)、DNA分子的切割與連接

一、DNA分子的切割與連接的一般原則

二、DNA分子的切割與連接的方法

三、DNA分子的切割與連接的影響因素

第五章、基因工程中的載體

第一節(jié)、質(zhì)粒載體概念

一、質(zhì)粒載體的一般生物學(xué)特性

二、多克隆位點

三、理想質(zhì)粒載體的必備條件

四、質(zhì)粒篩選標(biāo)記

第二節(jié)、噬菌體載體

一、噬菌體載體的生物學(xué)特性

二、λ噬菌體載體

第三節(jié)、其它載體

一、酵母載體、人工染色體載體

二、穿梭載體概念

第六章、目的基因克隆

第一節(jié)基因組DNA克隆

一、基因組DNA的制備與片斷化

二、基因組DNA文庫的構(gòu)建主要步驟

第二節(jié)PCR擴增法

一、RT-PCR法

第三節(jié)cDNA文庫構(gòu)建及篩選

一、cDNA文庫構(gòu)建主要步驟

第四節(jié)DNA的合成

一、DNA亞磷酸三脂法合成的原理

二、蓋帽反應(yīng)與氧化反應(yīng)

第五節(jié)轉(zhuǎn)化、篩選與鑒定

一、轉(zhuǎn)染，即重組DNA導(dǎo)入受體細胞（大腸桿菌）的主要步驟

二、重組子的篩選與鑒定中藍白篩選的原理

三、Sanger雙脫氧鏈終止法DNA序列測定的原理

第七章目的基因原核表達

第一節(jié)原核表達體系

一、宿主菌（E.coli的特點）

二、原核表達載體的核心元件：啟動子、終止子、SD序列

第二節(jié)原核表達策略

一、包涵體型表達

二、分泌型表達

三、融合型表達

第八章酵母基因工程

第一節(jié)酵母基因表達體系

一、列舉兩種主要酵母基因表達宿主系統(tǒng)

二、酵母基因表達載體的必備條件

三、基因打靶（基因剔除）

第九章動物基因工程

第一節(jié)轉(zhuǎn)基因動物

一、SV40病毒載體

第二節(jié)哺乳動物的顯微注射轉(zhuǎn)基因操作主要步驟

第三節(jié)動物轉(zhuǎn)基因生物反應(yīng)器應(yīng)用舉例

第十章植物基因工程

第一節(jié)常見的植物受體類型

一、原生質(zhì)體

二、葉盤

三、花

第二節(jié)植物基因工程載體

一、雙元Ti質(zhì)粒載體的主要構(gòu)成

第三節(jié)常見的植物轉(zhuǎn)基因方法

一、基因槍法

二、葉盤法

三、根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)法的主要步驟

第四節(jié)轉(zhuǎn)基因植物篩選與鑒定

第五節(jié)植物基因工程應(yīng)用舉例

第十一章基因工程相關(guān)新技術(shù)

第一節(jié)生物信息學(xué)

第二節(jié)芯片技術(shù)

第三節(jié)酵母雙雜交的主要技術(shù)原理

第十二章重組DNA技術(shù)的應(yīng)用

第一節(jié)DNA與疾病診斷

第二節(jié)遺傳基因的基因治療

主要參考文獻：《基因工程原理與技術(shù)》劉志國主編，化學(xué)工業(yè)出版社。

《基因工程學(xué)原理》馬建崗，西安交通大學(xué)出版社。

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